中药NGM 2

产品介绍

中药NGM 2是在新一代代谢组学基础上发展而来,沿袭了其精准的特点,主要解决中药相关研究群体核心需求:准确鉴定药用成分。中药NGM 2对于物质鉴定质与量达到了高水准,其原因有:

1、物质鉴定标准对齐国际顶级期刊(MSI),level 1鉴定实现了高鉴定准确率(约98%)和高检出数量(平均约300+);

2、超大专业数据库加持(5000+标准品数据库与1.5w+中药专属数据库强强联合),整体鉴定水平约1000+。




技术优势

◉  准:对齐国际MSI 标准,level 1鉴定准确率高达98%

  严:标准的数据库建立流程;超严格6D质控体系

  全:5000+ 药用成分标准品数据库(Biotree TCM)和1.5w+中药专属数据库(BT-HERB)

  多:高检出,level 1 平均检出 300+,部分项目检出高达600+

◉  优:仪器高灵敏、高分辨,性能稳定




样本要求

中药材

鲜样≥ 5g,干样≥1 g

中成药

≥1g

中药液

≥1ml

血清

≥1ml

生物学重复:每组样本数量≥6,所有重复样本独立分析,在收集之前请联系公司销售工程师





检测平台


新一代代谢组学NGM 2(图1)

Orbitrap Exploris 120, Thermo




应用方向

◉  中药药性成分及机制 

◉  中药质量标志物筛选 

◉  中药真伪/产地鉴别 

◉  中药制品开发




案例应用

英文标题:Revealing the mechanism of ethyl acetate extracts of Semen Impatientis against prostate cancer based on network pharmacology and transcriptomics

发表时间2024

发表期刊:Journal of Ethnopharmacology

影响因子:4.8

前列腺癌(Prostate cancer, PCa)是男性泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤,目前尚缺乏有效的治疗方法。急性子(Semen Impatientis)是一种白茎凤仙花的干成熟种子,被《中国药典》描述为一种传统中药(traditional Chinese medicine, TCM),在临床实践中用于治疗肿瘤、腹部肿块等。此外,在现代药理研究中,已报道了凤仙花的多种提取成分具有抗肿瘤活性。同样,在作者之前的研究中,急性子的各种提取物如水提取物、石油醚提取物、乙醇提取物、丁醇提取物、乙酸乙酯提取物均抑制PCa细胞的生长,但急性子乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extracts of Semen Impatientis, EAESI)表现出最强的抑制作用。然而,EAESI在体内对PCa的生物学作用及其具体的抗肿瘤机制尚不清楚,有待进一步探索。因此,作者通过体内和体外实验研究了EAESI对PCa的作用,同时通过网络药理学和转录组学分析,确定EAESI在PCa中的关键靶点,并进行了后续实验验证。本研究对EAESI的作用和机制的研究为其临床应用提供了实验证据,并可能有助于开发PCa治疗的替代靶点。

技术路线:

中药NGM 2(图2)

研究成果:

1.EAESI成分分析:采用UHPLC-MS/MS方法对EAESI样品进行非靶标代谢组学检测(由百趣提供),在EAESI中共鉴定出218种化合物,其中主要包括三萜37种,类黄酮35种,倍半萜17种,异黄酮类16种,木脂素11种。

2.EAESI可抑制AR(+)和AR(-)PCa细胞的增殖,并降低其活力:雄激素受体(androgen receptor, AR)是驱动PCa发展和进展的主要因素之一,根据AR表达的存在与否,PCa细胞可分为两类:AR(+)PCa细胞和AR(-)PCa细胞,EAESI可显著抑制细胞增殖,且呈浓度依赖性,并且经EAESI处理24 h后,g0/g1期LNCaP和PC-3细胞的比例明显增加。这些发现表明,EAESI通过诱导g0/g1期阻滞来抑制PCa细胞的生长,而与AR的表达状态无关。

3.EAESI抑制AR(+)和AR(-)PCa细胞的迁移和侵袭,诱导凋亡:为了评估EAESI对PCa细胞迁移能力的影响,作者在LNCaP、22Rv1、PC-3和DU145细胞单层达到适当的融合时进行划伤。用不同浓度的EAESI处理后,在特定的浓度,各细胞系的迁移受到了显著抑制。同时为了验证EAESI在PCa细胞中的促凋亡作用,采用流式细胞术检测EAESI对PCa细胞的促凋亡作用。综合结果表明,EAESI在机制上调控了凋亡蛋白BAX和BCL2的表达。

4.EAESI在体内抑制异种移植瘤的生长:为了评估EAESI在动物体内的抗肿瘤作用,作者将PCa细胞进行皮下注射,建立异种移植瘤模型。当异种移植瘤达到特定大小时,记录肿瘤大小,并给予药物治疗。实验结果表明,EAESI能够抑制体内PCa肿瘤的生长,这与EAESI对PCa细胞的抑制作用一致。

5.网络药理学分析显示AR是PCa中EAESI的靶点:

通过网络药理学方法来研究PCa中EAESI的关键靶点,根据TCMSP的数据库,在急性子中共鉴定出47种成分,筛选出9种生物活性成分。去除重复靶点后,获得167个药物相关靶点。作者通过搜索并整合了多个数据库的数据去识别PCa的疾病相关靶点,共识别出10064个靶点。随后,将药物相关靶点和疾病相关靶点进行关联,确定157个共同靶点,并认为是PCa中急性子提取物的潜在靶点。

通过化合物-靶点网络图分析表明化合物槲皮素在PCa中具有最多的靶点,PTGS1和PTGS2是与更多生物活性化合物相关的靶点。通过构建PPI网络图以及进行网络拓扑分析,结果表明EAESI可能通过AR、AKT1、MAPK1、TP53和CCND1这些靶点来抑制前列腺癌。RT-qPCR和WB结果显示,EAESI处理后AR的表达显著降低。AR的转录靶点TMPRSS2和PSA在药物干预后也显示出mRNA和蛋白表达水平的显著降低。以上研究结果表明,EAESI不仅抑制了AR的表达,而且还抑制了AR的转录活性。此外,细胞热位移实验(cellular thermal shift assay, CETSA)的结果表明,EAESI可以提高AR的热稳定性,这说明AR是EAESI的直接靶点。


中药NGM 2(图3)

 基于对EAESI处理后的PC-3细胞的RNA测序分析,鉴定和验证了ATF3作为EAESI靶点的作用

本研究除了研究EAESI在体内和体外对PCa的影响外,还采用网络药理学和转录组学分析来确定EAESI在PCa中的关键靶点,并进行了后续实验进行验证。研究结果表明EAESI在体内和体外对PCa均具有抗肿瘤作用。本研究对EAESI的作用及其作用机制的研究为其临床应用提供了实验证据,并对于开发前列腺癌治疗的替代靶点具有重要的意义。




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