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全转录组测序

产品介绍

全转录组是指特定组织或细胞在某一功能状态下转录产生的所有RNA的总和,包括mRNA和非编码RNA。与常规转录组测序相比,全转录组测序通过去除rRNA进行的建库和测序,可以同时获得mRNA、lncRNA和circRNA三种类型的RNA信息,并对其进行联合分析ceRNA分析,解析 RNA 分子间通过竞争结合 microRNA(miRNA)而形成的调控网络,为理解基因表达调控的复杂性提供了新视角。它将 mRNA、lncRNA、circRNA 等不同类型的 RNA 整合到统一的调控网络中,是当前非编码 RNA 功能研究和疾病机制探索的重要手段,尤其在精准医学和靶向治疗领域具有广阔应用前景。

1.两文库全转录组测序:LncRNA+miRNA 

(1)采用去核糖体链特异性建库方式,进行PE150测序,实现lncRNA、mRNA、circRNA鉴定和定量、以及功能分析;

(2)采用富集小RNA片段建库方法,进行PE150测序,实现miRNA、siRNA以及piRNA鉴定和定量,以及功能分析等;

2.三文库全转录组测序:LncRNA+miRNA+ CircRNA

(1)采用去核糖体链特异性建库模式,进行PE150测序,实现lncRNA、mRNA、鉴定和定量、以及功能分析;

(2)采用去除线性RNA,富集环状RNA建库方法,进行PE150测序,实现对低丰度的环状RNA鉴定和定量及功能分析;

(3)采用富集小RNA片段建库方法,进行PE150测序,实现miRNA的鉴定和定量,以及功能分析等; 

以上两种模式,还可以实现互作网络分析,以及内源竞争性RNA鉴定和网络分析。




技术优势

◉  全面性:同时检测多种RNA类型,避免单一RNA 测序的局限性,能更系统地解析转录调控机制

  高分辨率:可检测低丰度 RNA、可变剪接、RNA编辑等细微变化

  高通量:一次实验可获得海量数据,适合大规模样本分析

◉  互作网络构建:预测 lncRNA-miRNA、circRNA-miRNA、miRNA-mRNA 等相互作用,构建调控网络

◉  适用物种条件:动物、植物,同时需要有参考基因组和完整注释文件




样本要求

动物组织

实质脏器组织≥200 mg(脂肪、皮肤、骨头等RNA含量较低组织≥2 g)

植物组织

嫩叶根茎花果实≥500 mg

动物细胞

≥10

人全血PAXgene采血管

≥2管,按照PAXgene采血管使用说明操作即可

真菌菌体/菌丝

≥2*10个/500mg

全血trizol法

新鲜采集≥5 ml

RNA

总量≥5 μg





检测平台


Illumina NovaSeq X Plus.png

Illumina NovaSeq X Plus




应用方向

◉  基础研究:解析基因表达调控网络、细胞分化与发育机制、非编码 RNA 的功能等

◉  疾病研究:寻找疾病相关的 RNA 标志物(如癌症、神经退行性疾病),探索疾病发生发展的分子机制

◉  药物研发:筛选药物靶点,评估药物对转录组的影响,优化药物疗效

◉  农业领域:研究作物抗逆性、品质相关基因的表达调控,助力品种改良




案例应用

1. LncRNA H19/miR-675 axis drives metabolic reprogramming and therapeutic resistance in pancreatic ductal adenocarcinoma.2023.Nature Communications【IF=17.69】

2. LncRNA MIR155HG/miR-155-5p axis shapes tumor immune microenvironment by regulating PD-L1 expression in triple-negative breast cancer.2022.Advanced Science【IF=25.476】

3. Deep annotation of long noncoding RNAs by assembling RNA-seq and small RNA-seq data.2021.Nucleic Acids Research【IF=19.16】




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