文章标题：Integrated chemical composition, transcriptomics, and network pharmacology to reveal the mechanism of Jia-Wei-Si-Miao-Yong-An Decoction in ACS model rats
发表期刊：Phytomedicine
影响因子：8.3
研究背景
急性冠脉综合征(Acute Coronary Syndrome, ACS)是冠心病中最危重的临床类型，具有高发病率和高致死率，其病理核心是冠状动脉粥样硬化斑块破裂引发血栓形成，导致心肌急性缺血缺氧。尽管现代医学在抗血小板、调脂、血运重建等方面取得进展，但仍面临再狭窄、微循环障碍和药物耐药等问题。中医药在ACS治疗中展现出独特优势，尤其是复方中药的多成分、多靶点特性，为ACS的综合治疗提供了新思路。加味四妙勇安汤(HJ11)是在经典方剂四妙勇安汤基础上优化而来的中药复方，前期研究显示其能显著改善ACS模型大鼠的心功能和炎症反应但其具体作用机制尚不明确。本研究通过整合UHPLC-QE-Orbitrap-MS化学成分分析、转录组学、网络药理学及体内外实验验证，全面揭示了HJ11治疗ACS的分子机制（图1）。
技术路线
图1.技术流程图
研究结果
1、HJ11汤剂成分及入血成分的检测与表征
金银花为HJ11配方中的主要草本成分， HPLC定量显示其主要活性成分绿原酸含量为0.39%，总酚酸含量为0.57%（图2）。通过UPLC-QE-Orbitrap-MS技术，从HJ11汤剂中共鉴定出212种化学组分，包括35种有机酸、24种黄酮类、22种糖苷及17种酯类（图3）。进一步在大鼠血浆中鉴定出49种入血成分，以有机酸、黄酮类和氨基酸为主，提示这些成分可能是HJ11发挥药效的关键物质基础。代谢组学分析表明，HJ11入血成分在体内主要经历Ⅱ相代谢反应，其中黄酮类化合物的葡萄糖醛酸化是主要代谢途径。例如山奈酚在体内可转化为山奈酚-3-葡萄糖醛酸苷（图4），进一步增强了其生物活性与稳定性。
图2.HPLC对HJ11的主要成分测试结果
图3.HJ11及其单药在正离子（上）/负（下）离子模式下的总离子流图
图4.山奈酚的可能代谢途径
2、转录组与网络药理学揭示HJ11多靶点调控特征
对HJ11干预后的ACS大鼠心肌组织进行转录组测序，共筛选出1656个差异表达基因，其中包括TNF、白细胞介素家族、NF-κB、PRMT和DDAH等与ADMA代谢密切相关的基因（图5B）。进一步筛选出389个显著差异基因作为HJ11治疗ACS的潜在靶标，用于后续网络药理学分析。通过网络药理学整合分析，从TCMSP和UniProt数据库中共预测出75个活性成分及其对应的375个作用靶点（图5A）。将这些靶点与转录组差异基因取交集，最终获得229个“药物-疾病”共同作用靶点（图5C）。PPI蛋白互作网络分析显示，这些靶点形成了以NF-κB、eNOS、DDAH2等为核心的调控网络（图5D）。GO和KEGG富集分析表明，HJ11显著参与“对外源刺激反应”，“氧化应激反应”，“血管内皮功能调节”等生物过程，并涉及脂质与动脉粥样硬化、PI3K-Akt、TNF等信号通路，系统揭示了其多通路协同治疗ACS的潜力（图5E）。
图5.网络药理学预测结果
3、HJ11在ACS模型大鼠中的保护作用
动物实验显示，HJ11治疗可显著降低ACS大鼠血清ADMA水平，提高NO浓度，其效果与阳性药阿托伐他汀相当（图6A）。RT-qPCR和Western blot结果进一步表明，HJ11可显著下调ADMA合成酶PRMT1的表达，同时上调代谢酶DDAH2、AGXT2以及eNOS的表达，明确其通过调控DDAH/ADMA/NO通路改善内皮功能（图6B-C）。
图6.动物实验验证
4、HJ11对LPS诱导的HUVEC细胞损伤的影响
为了建立体外炎症模型，在浓度梯度(0.1–10 μg/ml)和时程暴露（24h或48h）下用LPS攻击人脐静脉内皮细胞HUVEC（图7A）。在LPS诱导的HUVEC炎症模型中，HJ11含药血清(6.25–25 μg/ml)以浓度依赖方式显著提升细胞活力（图7B），并降低ADMA及炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的水平（图7C）。此外，HJ11处理还可显著抑制LPS引起的ROS升高，表明其具备良好的抗氧化应激能力（图7D）。
图7.细胞实验验证
研究结论
本研究通过多组学整合策略，系统阐释了加味四妙勇安汤(HJ11)治疗ACS的多成分、多靶点作用机制。研究表明，HJ11可通过调控DDAH/ADMA/NO通路、抑制炎症反应与氧化应激，显著改善内皮功能紊乱。体内外实验一致验证了其降低ADMA、提升NO生物利用度、抑制炎症因子和ROS生成的药理作用。该研究不仅揭示了HJ11治疗ACS的科学内涵，也为中药复方在心血管疾病中的应用提供了扎实的药理学依据，具有重要的临床转化价值。
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