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蛋白熔解温度及聚集温度快速检测

实验背景

差示扫描荧光法(DSF)分蛋白内源性荧光和外加荧光然2种方法,与蛋白质疏水区域结合后,记录荧光强度的变化,进行构象稳定性的评估。DSC对于蛋白质浓度范围通常有一定的限制,而 DSF则可以对0.05-200 mg/mL浓度范围内的蛋白质进行检测,而对于蛋白药物考察其在长期贮存的配方浓度条件下的稳定性是更加关键和必要的。DSF方法具备样品需求量小、检测通量高、方法设置简单、检测时间短等优势,普遍用于药物早期开发、制剂处方工艺开发、强制降解实验等场景中。蛋白溶解温度(Melting Temperature,即Tm值),是检测蛋白稳定性的基本参数,用于评价药物的结构热稳定性,Tm值越高,即表示药物结构热稳定性越好。静态光散射(Sta Lighting Scattering ,即SLS),根据升温过程中蛋白分子散射光强的增加检测蛋白起始聚集温度(Aggregation Temperature ,即Tagg),Tagg值越高,即蛋白开始聚焦的温度越高,表面蛋白制剂胶体稳定性越高。

Uncle配备了全光谱荧光扫描模块,直接测量内源荧光的变化来确定蛋白质的解链温度,与基于光散射或量热法的方法不同,内源荧光是观察蛋白质解折叠的为数不多的直接方法之一,即使在聚集之后也可以观察到。

Uncle配备了两个不同波长的SLS激光来检测大小颗粒,从而了解蛋白质在热升温过程中的聚集方式和时间,进而对您的候选分子或配方进行排名,或找到能阻止或延迟聚集发作的赋形剂。由于蛋白质不但可以解折叠,并且可以聚集,因此与Tagg同时测量Tm可以确定是否是解折叠导致了聚集。


适用样本

蛋白类样本为主


主要设备

高通量多参数蛋白稳定分析仪(uncle)


送样要求

建议样品浓度高于2 mg/mL, 体积50μL。具体送样要求联系对应商务。


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